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肿瘤标志物汇总及各种标志物解析(五)

浏览次数:130      日期:2018-10-30 14:09:59

铁蛋白 (Ferritin,FER),是一种由24条轻链和重链组成的球蛋白,分子量为450kDa,在原核和真核生物中是重要的贮铁蛋白,其功能是维持机体铁离子的可溶和非毒性状态。铁蛋白分布于整个机体,尤其以肝细胞和网状内皮细胞含量最多,以痕量形式存在于血清中,能够反应机体内铁离子含量。


铁蛋白含量测定是目前检测铁缺乏最准确的途径。事实上,所有血清铁和铁蛋白低的患者都存在铁缺乏。血清铁蛋白含量是区别缺铁性贫血(血清铁蛋白减少)和慢性疾病贫血(血清铁蛋白正常或上升)的重要指标,也可用于区别小红细胞症(铁蛋白含量低)和轻型地中海贫血(铁蛋白正常或升高)。铁缺乏伴随着铁蛋白含量减少常出现在月经期和育龄期妇女以及儿童体内。


血色病、急性肝炎、恶性肿瘤和慢性炎性疾病患者体内也会出现血清铁蛋白含量的升高。


人FER单克隆抗体

科赛格最新推出新一代高质量的抗人铁蛋白单克隆抗体,适用于高灵敏度的双抗夹心法免疫检测。利用我公司化学发光检测平台对本公司自产的抗体对进行表征,其检测范围广,灵敏度高。检测范围约为2.5-600 ng/mL,最低检出限可达2.5 ng/mL。将所推荐的抗体对经过大量的正常血清样本、贫血样本和炎症病理样本测试,检测结果显示与临床诊断符合率高。


校准曲线

A. 化学发光平台

所有的单克隆抗体分别用作捕获抗体和标记抗体,组合成不同抗体对,用于双抗夹心法免疫检测。不同抗体对分别对各种浓度的铁蛋白进行定量检测,最优推荐的配对方式如下(捕获抗体-标记抗体):

A组合:CSB-DA027BmN①- CSB-DA027BmN②;

D组合:CSB-DA027BmN④- CSB-DA027BmN③。

▲图1. 两组铁蛋白抗体组合检测铁蛋白的校准曲线


B. 胶乳比浊平台

将几株单抗按照一定比例混合后,偶联至胶乳微球,并检测不同浓度的铁蛋白,检测信号与蛋白浓度之间关系如下(图2):

▲图2. 人铁蛋白校准曲线


临床比对

A. 化学发光平台

利用本公司的化学发光检测平台分析两对抗体的检测性能,对70份血清进行测试,其结果与雅培化学发光诊断试剂测值进行比对,通过Passing-Bablok回归分析,两组抗体的临床检测结果很理想(如图3),与雅培检测值相关系数高达0.97,表明该抗体适用于双抗夹心的ELISA或化学发光平台。

▲图3. 两组铁蛋白抗体测临床样本与商业试剂盒比对结果


B. 胶乳比浊平台

将自产铁蛋白抗体制备出比浊试剂,对35份赋值样本进行检测,结果如图4。两者相关性高达0.99,表明该抗体适用于胶乳比浊平台。

▲图4. 胶乳比浊平台上对.临床血样的检测


稳定性

A. 化学发光平台

将铁蛋白单抗(未添加保护剂)分别置于-20℃、2-8℃和37℃,每隔3天测抗体的效价。结果如下(图5),结果表明该抗体在37℃稳定性良好,效价均维持在95%以上。

▲图5. 不同条件下抗体稳定性检测


B. 胶乳比浊平台

将抗体(未添加保护剂)分别置于2-8℃和37℃放置7天后,再制备成胶乳试剂。制成的试剂检测不同浓度的铁蛋白校准品,结果如下(图6),可以看出处理前后抗体测得蛋白浓度基本一致,说明该抗体稳定性良好。

▲图6. 热处理对抗体性能的影响


重组铁蛋白轻链

铁蛋白轻链是由FTL基因编码的175氨基酸的蛋白,是铁蛋白的重要组成部分。本公司重组表达的铁蛋白轻链,货号为CSB-DP027B,该蛋白适用于免疫检测的校准品和免疫印迹等试验。



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