传统MMLV不耐高温，只能在相对较低的温度(50°C)下维持其活性。但是在cDNA合成的步骤当中，高的逆转录温度有助于RNA二级结构的打开和高GC含量的RNA的变性，提高引物与目标基因结合的特异性，从而能增加cDNA合成的产量和PCR过程的扩增效率。与野生型MMLV逆转录酶相比，本公司改造的逆转录酶M-MLV Reverse Transcriptase展现出更高的热稳定性，低RNase H活性和高抑制物耐受性，与其他耐高温逆转录酶相比，有更高的cDNA合成率。它可以在高达60°C的温度下的完成第一链cDNA合成，适用于具有高二级结构(如病毒基因组)的RNA的逆转录。

 

本公司在此基础上研制的一步法RT-qPCR试剂(One Step RT-qPCR Kit)是以RNA为模板，在同一反应管中进行逆转录和定量PCR反应的试剂盒，简化了实验操作。体系中包含RNA酶抑制剂、UDG等，能减少RNA模板降解，防污染。优化后的缓冲和酶系能够提高逆转录合成效率，而且耐受度高，具有一定的抗抑制效果，适用于多种模板荧光探针法（一步法扩增）的特异性检测系统。

 

 

1）与同类产品SDS-PAGE电泳检测对比

 

Line 1、2、3：CSB-DEM025 M-MLV逆转录酶

Line 4：品牌B M-MLV 逆转录酶

 

 

2）与同类产品的逆转录温度测试对比

 

 

3）加速热稳定性

 

CSB-DEM025 M-MLV逆转录酶 37℃加速6天，性能基本维持不变

 

另外，本公司开发的RTX Reverse Transcriptase是经过基因工程改造的全新逆转录酶，具有更高的热稳定性和更高的盐耐受能力，可用于具有二级结构的RNA 模板的逆转录。逆转录温度在60-70°C具有更优的活性，同时具有DNA和RNA聚合能力，可完成 cDNA合成和RT-LAMP实验。

 

武汉华美生物工业原料事业部持续专注开发优化用于DNA和RNA检测的创新高效酶，也一直对MMLV逆转录酶进行不断地改进和优化，提供免费试用服务，欢迎咨询。

 

 

武汉华美生物工业原料事业部不仅可以为客户提供相关分子生物学产品，并且能够根据客户需求依托公司深厚的技术积累和研发创新实力，为客户提供个性化定制开发和针对性的系统解决方案，以客户为中心，全力满足客户需求。